Растеж и размножаване на бактериите в твърди и течни хранителни среди

Слайд 1

Растеж и размножаване на бактериите в твърди и течни хранителни среди
I. Състав на хранителните среди
Хранителни вечества
Източници на енергия - орг. / неорг.
Микроелементи – Ca, Mg, Fe, K и др.
Соли – на Cl, P, Na и др. (особено важен е NaCl)
Растежни фактори – аналог на витамините при човека
II. Регулация на подходящо рН
Подкисляване – 10% р-р на HCl или млечна киселина
Алкализиране – 10% р-р на КОН или NaOH

Слайд 2

III. Видове хранителни среди
Според консистенцията:
Течни – за натрупване на биомаса;
Полутвърди – за съхранение;
Твърди – за изолиране на чиста култура, АБ и др.;
Прахообразни – приготвени фабрично.

• Втвърдители: агар агар, желатин, силикагел

• Според състава:
Естествени
Изкуствани
Синтетични
• По своето предназначение:
Обикновени (основни) – МПБ, Пептонна вода, МПА, Трипсинов бульон;
Сложни – биват 3 вида

Слайд 3

Сложни хранителни среди
Елективни:
Кръвен агар – МПА + дефибрилирана кръв (хемолитична активност)
Шоколадов агар – КА, загрят на водна баня до 80°С
Глюкозен бульон – МПБ + 1% глюкоза
Коагулиран серум по Льофлер – животински серум + глюкозен бульон (дифтерийни бактерии)
Картофено-глицеринов-кръвен агар на Борде-Жангу (коклюшни бактерии)
Селективни:
Селенитов бульон (дифтерия, салмонела)
Петраняни – белтък, глицерин, малахитово зелено (туберколозни бактерии)
Льовенщайн-Йенсен (туберколозни бактерии)
Апохолат-цитрат агар (чревни – подтиска G+, стимулира G-)
Брилянтгрюх-фенолрот агар (чревни: лактоза+ са жълти; лактоза- са розови)
SS-агар – задържат растежа на E. coli, а на Salmonella и Shigella го стимулират

Слайд 4

3. Диференциращи (индикаторни). Биват 2 вида:
За диференциране:
Ендо
Гаснер
Левин
МакКонки
Клауберг
За идентификация:
Среда на Хис (пъстра редица)
Клиглер (отчита 5 признака)

4. Среди за анаеробно култивиране:
Среда на Тароци
Среда на Цайслер

5. Среди за определени микроорганизми
Мюлер Хинтон – АБ
Сабуро – Candida
TCBS – холера
Ралович - листерия

Слайд 5

1. Твърда ХС в петриева паничка

2.Твърда ХС в епруветка – прав агар
(посявка на бод)
3.Твърда ХС в епруветка
– полегат агар
4.Течна ХС в епруветка

Слайд 6

Техника за посявка и пресявка. Изолиране на чиста култура

Слайд 7

Аеробно и анаеробно култивиране
Аеробно култивиране
Анаеробно култивиране:
Биологично – метод на Фортнер
Химично – метод на Бухнер (пирогликол + КОН)
Физично: • микроанаеростат
• стъклен звънец
• система GasPak (2 таблетки – лимонена к-на+натриев бикарбонат; кубалтов хлорид+ натриев барохидрат)

Слайд 8

Развитие на бактериалната култура, според отношението й към кислорода

Слайд 9

Методи за проучване на ензимната активност на изолираните в чиста култура бактерии. Физиология на бактериите.
Доказване на индол – отделя се при разграждане на АК триптофан ((+) E. coli; (-) Klebsiella)
Доказване на H2S – краен продукт при разграждане на АК, съдържащи сяра (цистин, цистеин, метионин) ((+) Salmonella; (-) Proteus)
Доказване на каталаза - ... + Н2О2 → отделя се газ О2 ((+) S. epidermidis; (-) S. pyogenes)
Доказване на оксидаза – реактив се накапва върху отделна колония ((+) розовочервени (тъмнокафеви) - P. aeruginosa; (-) не променят цвета си - E. coli)
Доказване на уреаза – зелена среда ((+) синя; (-) жълта)
Доказване на ФАД – накапва се 10% FeCl3 ((+) позеленява Proteus; (-) остава бяла - E. coli)
Отчитане на Симонс (доказване на ензими, разграждащи цитрат) - тюркоазена среда ((+) синя; (-) остава непроменена)
Доказване на коагулаза – заешка плазма + физиол. р-р ((+) образуват съсирек – S. aureus; (-) не образуват съсирек – S. epidermidis)

Слайд 10

9. Отчитане на Клиглер – отчита лактоза, глюкоза, сероводород, уреа, отделяне на киселина и газ.
10. Определяне броя на МО в 1 мл по оптичен стандарт (отчитане по Макфарланд) – 1 000 000 бактерии в суспензия – 0,5 MF

Регистрирайте се за пълен достъп