Влияние на факторите на външната среда върху МО – физични фактори

Слайд 1

I. Влияние на факторите на външната среда върху МО – физични фактори
t
МО не притежават терморегулация !

3 гр. спрямо отношението им към t
Психрофилни – опт. 15-20°С
Мезофилни – 30-40°С
Термофилни – 50-60°С

↑ t – на 100°С умират вегетативните клетки;
- на 121°С/20 мин (влажна среда); 180°С/1 час (суха среда) – умират спорите;
↓ t – дълго време не убиват МО, само задържат растежа им.

Слайд 2

Налягане
МО издържат ↑ налягане, но следните комбинации могат да се прилагат за стерилизация:
- ↑ налягане + ↑ температура (автоклав) - 121°С/20 мин;
- налягане + газове (O2, CO2, H2S, Cl2 ) – стерилизация на плодови сокове.


Ултразвук
има силно влияние върху МО – 0,3-0,5 W/cm²
В бъдеще може да се използва за студена стерилизация

рН - за повечето МО оптималното е 7-8
плесени, дрожди, туберкулоза – 3-6;
холера – алкална среда

Слайд 3

Светлина (метод на Бухнер)
- почти всички видове растат добре на тъмно
- разсеяната светлина задържа растежа им
- преките слънчеви лъчи ги убиват

Кислород – по отношение на О2 биват:
- Аероби – нуждаят се от О2
- Факултативни анаероби – използват го, когато е достъпен, но живеят и без него
- Анаероби: облигатни - О2 е токсичен за тях
аеротолерантни – не загиват в О2 среда
- Микроаерофили – изискват по- ↓ конц. на О2 от тази в атмосферата и по- ↑ на СО2 - 5-10% (гонококи, менингококи)

Слайд 4

Влияние на факторите на външната среда върху МО – химични фактори
Химичните съединения могат да имат:
бактериостатичен ефект – подтискат размножаването, но клетката е жива;
бактерициден ефект – убиват клетките.

етилов алкохол – коагулира белтъците;
детергенти – нарушава избирателната пропускливост на ЦПМ;
метални йони – нарушават обменните процеси в клетката.

За МБЛ най-често приложение – хлорамин, 70% етилов алкохол.

Слайд 5

II. Стерилизация
Уреди и процеси за стерилизация.
● с топлина
Автоклав (стерилизация с влажна топлина)
стерилизира посредством налягане и температура - 121°С/1 атм. /20 мин
захарите и други лабилни съед-я се стерилизират отделно.
Апарат на Кох (фракционна стерилизация)
режим – 3 последователни дни/ ½ - 1 час (за убиване на спори)
Сушилен шкаф (стерилизация със суха топлина)
режим – 160-180°С/1-2 часа

Слайд 6

Тиндализация
t – по-ниска от 100°С за неустойчиви съставки (например белтъци). Провежда се във водна баня.
режим – 5 дни/56-58°С/1 часа (първи ден – 2 часа)
- 3 дни/70-80°С
Пастьоризация
използва се в ХВП за мляко и вино. Провежда се на водна баня.
режим – 50-60°С/15-30 мин
- 70-80°С/10-15 мин
Стерилизация чрез опламеняване (фламбиране)
стерилизират се на спиртна лампа йозета, игли, предметни стъкла и др.

Слайд 7

● с лъчения
Нейонизиращи лъчения
ултравиолетово облъчване – бактерицидна лампа
радиочестотно облъчване - в ХВП
Йонизиращи лъчения
използват се в ХВП и за медицински консумативи (конци, превързочни материали) чрез мощни електронни ускорители.
Тук се включва и стерилизация чрез гамалъчи – за хормони, витамини, АБ и др.

● с бактериални филтри
– за материали, които не се нагряват

Слайд 8

III. Дезинфекция
Вегетативните форми на МО умират, но спорите – не!
Биват:
Халогенни дезинфекционни средства – хлорамин, йод;
Фенол;
Формалдехид – формалин;
Окислители – водороден прекис;
Алкохоли – 70% етилов алкохол;
Киселини – HCl
Основи – NaOH
Детергенти (ПАВ)
Хлорхексидинови препарати

Слайд 9

IV. Антимикробна химиотерапия
Антимикробни средства:
- Антибиотици – продукти от биопродуценти;
Химиотерапевтици – лабораторно синтезирани.

Терапевтична ширина – разликата между токсичната и терапевтична доза. Изразява се чрез т.нар. терапевтичен индекс.

Ако терапевтичната ширина е малка е нужно прецизно дозиране!

Минимална бактерицидна концентрация
Минимална инхибираща концентрация

Слайд 10

V. Изследване на антимикробната активност на МО
Метод на серийните разреждания
1. Разлива се 1 см³ ХС в епруветки
2. 1 см³ от АБ/ХТ се добавя в първата епруветка + разбъркване
3. 1 см³ се прехвърля от 1вата във 2рата епруветка, от 2рата – в 3тата и така до предпоследната, като от нея се изхвърля 1 см³
( последователно се разбърква всяка епруветка)
4. Последната епруветка не съдържа препарата – контрола
5. Във всяка епруветка се добавя бактериална култура

Концентрацията на АБ/ХТ намаля двойно във всяка следваща епруветка. След 24 ч/37°С се отчита МПК (минимална подтискаща конц.) – последната епруветка от редицата, при която има задържане на развитието на микроба. Разреждането на тази епруватка се нарича титър на изследвания АБ/ХТ (напр. 1:32)

Слайд 11

Метод на серийните разреждания (определяне на минимална подтискаща концентрация на АБ)

Слайд 12

Метод на дифузия в агарова среда

Използва се ХС Мюлер-Хинтон!
1. извършва се посев на изолирания микроб (0,5 МF). Посявката може да се излее в петрито, може да се разнесе с памучен тампон на много плътни щрихи, като накрая се обтрива периферията на петрито.
2. Петрито се суши в термостат – 20 мин
3. Поставят се 5-6 диска с АБ
4. Петрито се държи 30 мин на стайна температура (за предифузия на препарата)
5. Култивира се в термостат 18 часа/37°С

Отчитане:
С линия се мерят в мм зоните на подтискане растежа на микробите и се отчита чувствителността.
S – 18 мм и повече
I – 12-18 мм
R – 12 мм и по-малко

Регистрирайте се за пълен достъп